傲视天鹰医学考研练习:蛋白质的分离和纯化

时间:2019-7-5 分享到:

傲视天鹰医学考研练习:蛋白质的分离和纯化

傲视天鹰医学考研练习每日一练:蛋白质的分离和纯化

【知识点】蛋白质的分离和纯化蛋白质分离通常就是利用其特殊理化性质,采取透析、盐析、电泳、层析及超速离心等不损伤蛋白质空间构象的物理方法,以满足研究蛋白质结构与功能的需要。(1)蛋白质分离和纯化的方法
方 法
原 理
目 的
透析
利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物(如硫酸铵、水)分开
去除蛋白质溶液中的小分子化合物,浓缩蛋白质溶液
超滤法
应用正压或离心力使蛋白质溶液透过超滤膜
丙酮沉淀
①必须在0~4℃低温下进行,丙酮用量一般10倍于蛋白质溶液体积②蛋白质被丙酮沉淀后,应立即分离,否则蛋白质会变形
沉淀蛋白质
盐析
将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液,使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏,即去除蛋白质在水溶液中的稳定性因素
沉淀蛋白质
免疫沉淀
蛋白质具有抗原性,利用特异抗体识别相应的抗原蛋白,并形成抗原抗体复合物的性质,可从蛋白质混合溶液中分离获得抗原蛋白。
沉淀蛋白质
电泳
蛋白质在高于或低于其pI的溶液中成为带电颗粒,在电场中能向正极或负极方向移动,带电多、分子量小的蛋白质泳动速率快
分离蛋白质
层析
待分离蛋白质溶液经过一个固态物质时,根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小(凝胶过滤)、电荷多少(离子交换层析)及亲和力(亲和力层析)等分离蛋白质
分离蛋白质
超速离心
利用蛋白质颗粒沉降行为(沉降系数)不同分离蛋白质
分离蛋白质
(2)阴离子交换层析     将阴离子交换树脂颗粒填充在层析管内,由于阴离子交换树脂颗粒上带正电荷,能吸引溶液中的阴离子。然后再用含阴离子(如cl-)的溶液洗柱。含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。增加cl-浓度,含负电量多的蛋白质也被洗脱下来,于是两种蛋白质被分开。(3)凝胶过滤     又称分子筛层析。层析柱内填满带有小孔的颗粒(常由葡聚糖制成)。蛋白质溶液加于柱之顶部,任其往下渗漏,小分子蛋白质进入孔内,因而在柱内滞留时间较长,大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出,因此不同大小的蛋白质得以分离。【注意】①阴离子交换层析时,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来,而含负电量多的蛋白质后被洗脱下来。

②凝胶过滤时,大分子蛋白质由于不能进入孔内而被首先洗脱下来,而小分子蛋白质后被洗脱下来。

你的正确率:  

评语:  


距离2020年全国硕士研究生招生考试初试还有:

傲视天鹰医学考研上海总部面授集训营免费试学报名(每周上课,随到随学,资料费、培训费、住宿费):


傲视天鹰医学考研练习:蛋白质的分离和纯化

版权所有:http://www.astyyk.com 转载请注明出处
 
在线咨询